polyakryyliamidigeelillä valmistetaan lähtö siinä. Geeli kaatamallakuumaa nestettä polyakryyliamidiliuosta matalaan ruutuun . Pakkauksen tulee sisältääcomblike rakenne hampaat osoittavat alasratkaisu . Polyakryyliamidi tuleegeelin pian sen jälkeen, kun se on kaadettu , jakampa poistetaan paljastaa suorakulmainen reikiä .
Natriumdodekyylisulfaatti ( SDS )
proteiini käsitellään natriumdodekyylisulfaattia ( SDS) , jotta voidaan denaturoidaalayksiköt suuri proteiini , joten jokainen voidaan mitata erikseen . Etuja näin on , ettäSDS antaapolypeptidejänegatiivinen varaus , joten ne siirtyvät kohtinegatiivista loppuun , tai anodi , geelin . ToiseksiSDS varmistaa kaikki alayksiköt onsama varaus ja siksi kaikki vaeltavatgeelin mukaan niiden molekyylimassat sijaan maksuja .
Proteiinin
pieni määrä DNA: ta tai proteiinia, on sijoitettu yksisuorakulmainen reikien toiseen päähän geelin . Sähkövirta läpigeelin neutraalissa pH: ssa . Noin 10 mikrolitraaDNA- tikkaat sekä kaksi valvonta on myös ladattu geeli . DNA- tikapuut käytetään mahdollistamaan mittaus siitä, kuinka pitkällenäyte siirretään prosessissa elektroforeesilla.
Elektroforeesi
Sitten kone kytketään päälle 100 volttia ja anna kestää 30 minuuttia . Sen jälkeen , kun näytteet on elektroforeesissa 30 minuuttia ,geeli sekätarjotin poistetaan ja sijoitetaanvärjäytymisen lokeroon noin kolme minuuttia . Tätä seuraa sitten asettamalla geeliä lämpimällä vedellä viisi minuuttia . Geeli on nyt valmis saatetaanvalolaatikkoon jotta tarkkaillaliikkeenDNA-fragmenttien .
Muita näkökohtia
Kun tarkasteletgeeliävalossa joitakin tärkeitä asioita on otettava huomioon . Solu voi olla joko heterotsygoottisia tai homotsygoottisia geenin riippuen siitä, onko kopio on läsnä tai ei ole läsnä molemmat kappaleet tai vain yksi . Heterotsygoottinen tulos voi esiintyä yhtenä rintamana , koska DNA-segmentit , jotka on monistettu tehokkaammin näkyvät tummempi geelissä . Väriaine on myös lisätty, jotta jokainen polypeptidi voidaan nähdä aikana ja sen jälkeen elektroforeesilla.