Vuonna 2007 julkaistu Guitar Hero III oli valtava kaupallinen menestys, ja sitä myytiin yli 14 miljoonaa kappaletta maailmanlaajuisesti. Se sai myös kriittistä kiitosta, ja monet ylistivät sen laajennettua ääniraitaa, parannettua pelattavuutta ja uusia ominaisuuksia.
Guitar Hero III esitteli sarjaan useita uusia innovaatioita, mukaan lukien:
- Yhteistyötila, jossa kaksi pelaajaa liittyi samaan kappaleeseen
- "Battle Mode", jonka avulla pelaajat voivat kilpailla toisiaan vastaan
- Laajennettu ääniraita, joka sisälsi yli 70 kappaletta useista eri genreistä
- Uusi pelitila nimeltä "Expert+", joka haastoi pelaajat entistä vaikeammilla muistiinpanokaavioilla
Monet pitävät Guitar Hero III:ta sarjan parhaana pelinä, ja se asetti standardin tuleville Guitar Hero -peleille.