Häntä voi pelata vain 16-bittisessä pelissä Sonic &Knuckles , joka julkaistiin erillisenä patruunana. Voit sitten asettaa Sonic &Knuckles -kasetin Sonic the Hedgehog 3 -kasetin päälle avataksesi "Lukitus"-ominaisuuden. , jonka avulla voit pelata Knucklesina pelin uudessa versiossa.
Vaikka Knuckles ei ole suoraan pelattavissa Sonic 3:ssa, hän esiintyy pomohahmona pelissä.