Kesällä 1928 Ub Iwerks, yksi Disney Brothers Studiossa Los Angelsissa työskentelevistä animaattoreista, näki hiiren kiertelevän studiossa. Yritys oli juuri menettänyt oikeudet Oswald the Lucky Rabbitiin heidän menestyneen sarjakuvatähtensä. Walt Disney oli mukana hänen toimistossaan piirsi luonnoksia uudelle hahmolle, kun hän muisti nähneensä hiiren. Hän piirsi karkean luonnoksen jyrsijästä.
Mikki Hiiri on syntynyt
Ub Iwersk käytti Disneyn luonnosta luodakseen useita piirustuksia hahmosta. Disney piti malleista ja antoi hiirelle nimen Mikki Hiiri. Iwerks ja Disney tekivät yhteistyötä luodakseen ensimmäisen Mikki Hiiri -sarjakuvan, "Steamboat Willie". Sarjakuva oli valtava menestys ja Mikki Hiirestä tuli nopeasti yksi maailman suosituimmista hahmoista.
Inspiraatio Charlie Chaplinilta
Walt Disney sai inspiraationsa myös mykkäelokuvakoomikosta Charlie Chaplinista Mikki Hiiren luomisessa. Chaplinin omat viikset, derbyhattu ja löysät housut sisältyivät Mikin suunnitteluun. Disney ihaili myös Chaplinin kykyä välittää tunteita ilman sanoja, ja hän halusi Mikin. Hiirellä on sama kyky.