Lady Macbeth: Macbethin vaimo ja salaliittolainen. Hän on häikäilemätön ja kunnianhimoinen nainen, joka pakottaa Macbethin tappamaan kuningas Duncanin. Murhan jälkeen Lady Macbeth kärsii syyllisyydestä ja katumuksesta, ja lopulta hän kuolee hulluuden tilassa.
Kuningas Duncan: Skotlannin kuningas näytelmän alussa. Hän on ystävällinen ja hyväntahtoinen hallitsija, ja hänen murhansa Macbethin toimesta käynnistää tarinan traagiset tapahtumat.
Banquo: Kenraalitoveri ja Macbethin läheinen ystävä. Hän epäilee Macbethin osallisuutta kuningas Duncanin murhaan, ja lopulta hänestä tulee Macbethin vainoharhaisuuden uhri.
Kolme noitaa: Kolme yliluonnollista hahmoa, jotka ennustavat, että Macbethistä tulee kuningas. Heidän ennustuksensa käynnistävät näytelmän tapahtumat, ja niitä käytetään kohtalon ja kunnianhimojen seurausten symbolina.
Macduff: Skotlantilainen aatelismies, joka vastustaa Macbethin hallintoa ja johtaa lopulta voimia, jotka kaatavat hänet.
Malcolm ja Donalbain: Kuningas Duncanin pojat. Malcolm pakenee Englantiin isänsä murhan jälkeen ja palaa lopulta Skotlantiin johtamaan armeijaa Macbethia vastaan. Donalbain pakenee myös Skotlannista murhan jälkeen, mutta hänellä ei ole merkittävää roolia näytelmän loppuosassa.
Hekate: Noituuden ja taikuuden jumalatar. Hän esiintyy näytelmän III näytöksessä ja käskee noitia tekemään käskynsä.