Tuomiopaikka sijoittuu venetsialaiseen tuomioistuimeen, ja asiaa johtaa Venetsian herttua. Shylock on päättänyt kostaa Antoniolle, joka on julkisesti loukannut ja kohdellut häntä huonosti aiemmin. Antonio puolestaan on alistuva kohtalolleen ja valmis kuolemaan.
Portia, nuori nainen, joka on naamioitu miesasianajajaksi nimeltä Balthazar, saapuu oikeuteen edustamaan Antonioa. Hän kyseenalaistaa Shylockin oikeuden vaatia kiloa lihaa väittäen, että velkakirja ei täsmennä, mistä liha on otettava. Hän huomauttaa myös, että Shylockin vaatimuksen motiivina on viha ja pahuus, ei oikeudenmukaisuus.
Lopulta Portian väitteet voittaa ja Shylock voitetaan. Hän joutuu luopumaan vaatimuksestaan Antonion lihaan ja kääntymään kristinuskoon. Antonio säästyy ja Shylock jätetään nöyryytetyksi ja tappioksi.
Venetsian kauppiaan tuomio on monimutkainen ja kiistanalainen kohtaus, jota on tulkittu monin eri tavoin. Jotkut pitävät sitä oikeudenmukaisuuden ja armon voittona, kun taas toiset pitävät sitä ankarana ja epäoikeudenmukaisena rangaistuksena Shylockille. Viime kädessä jokainen päättää itse, miten hän tulkitsee tuomion ja sen merkityksen näytelmässä.