Ammuskelu tapahtui Flamingo Roadin ja Koval Lanen risteyksessä vain minuutteja sen jälkeen, kun Shakur oli osallistunut Mike Tyson vs. Bruce Seldon nyrkkeilyotteluun MGM Grandissa. Shakur ajoi autossa, jota ajoi Death Row Recordsin toimitusjohtaja Suge Knight. Kun he odottivat liikennevaloa, valkoinen Cadillac ajoi heidän viereensä ja avasi tulen. Shakuria lyötiin useita kertoja ja hän kuoli kuusi päivää myöhemmin saamiinsa vammoihin.
Tupac Shakurin murha on edelleen ratkaisematta. Ammuskelun syyllisyydestä on esitetty lukuisia teorioita, mutta ketään ei ole koskaan syytetty rikoksesta. Jotkut uskovat, että ampumisen toteuttivat Southside Crips, Los Angelesin katujengi, jonka kanssa Shakur oli riitauttanut aiemmin. Toiset uskovat, että ampumisen järjesti kilpaileva levy-yhtiö Bad Boy Records tai korruptoituneet poliisit.
Shakurin kuolema oli suuri menetys hip-hop-yhteisölle. Hän oli yksi sukupolvensa vaikutusvaltaisimmista räppareista, ja hänen musiikkiaan kuuntelevat ja nauttivat edelleen fanit ympäri maailmaa.