Rivi "Älä nuku enää!" sillä on näytelmässä useita merkityksellisiä kerroksia. Yhdellä tasolla se on yksinkertaisesti Macbethin käsky koko perheelle pysyä hereillä ja olla hereillä, koska hän pelkää, että jokin on mennyt pieleen. Linja sisältää kuitenkin myös syvempiä merkityksiä ja ennakoi tulevia tapahtumia.
Ensinnäkin rivi "Älä nuku!" voidaan nähdä vertauskuvana viattomuuden menetyksestä ja Macbethin pimeyteen laskeutumisen alkamisesta. Näytelmän tähän vaiheeseen asti Macbeth on kamppaillut omantuntonsa kanssa ja osoittanut katumusta teoistaan. Kuitenkin lausumalla rivin "Älä nuku!" hän karkottaa tehokkaasti unen ja sen myötä kaikki mahdolliset lunastusmahdollisuudet. Tämä viiva merkitsee käännekohtaa Macbethin hahmossa ja symboloi hänen syleilyään pahuudesta.
Toiseksi rivi "Älä nuku!" on voimakas kirous, jonka Macbeth heittää itselleen ja koko perheelle. Kieltämällä itseltään ja muilta kyvyn nukkua, Macbeth luo jatkuvan levottomuuden ja ahdistuksen tilan. Uni yhdistetään usein rauhaan, palautumiseen ja alitajuntaan, ja riistämällä itsensä siitä Macbeth luo alustan sitä seuraaville henkisille ja tunneperäisille myllerryksille. Lause viittaa siten siihen, että Macbethin kokemasta syyllisyydestä, pelosta ja vainoharhaisuudesta ei ole hengähdystaukoa.
Kolmanneksi rivi "Älä nuku!" ennakoi häiritsevän unissakävelyjakson, jonka Lady Macbeth kokee myöhemmin näytelmässä. Kun Macbethin syyllisyys kuluttaa yhä enemmän, Lady Macbeth alkaa kärsiä unissakävelystä ja painajaisista, joiden aikana hän toistaa jatkuvasti lausetta "Out, pirun paikka!" (Näyttö 5, kohtaus 1). Tämä linja toistaa tietyssä mielessä Macbethin aikaisempaa käskyä korostaen pariskuntaa kohdannutta unettomuutta ja henkistä tuskaa.
Lopuksi rivi "Älä nuku!" on ratkaiseva hetki Macbethissä, joka viestii Macbethin muuttumisesta häikäilemättömäksi ja syyllistyneeksi yksilöksi. Se toimii vertauskuvana viattomuuden menetyksestä, voimakkaana kirouksena ja ennusteena tulevista onnettomuuksista, jotka odottavat Macbethia ja hänen ympärillään olevia.