Aloysia Weber syntyi Zell im Wiesentalissa Schwarzwaldin alueella Saksassa 12. marraskuuta 1760. Hänen isänsä Fridolin Weber oli muusikko ja musiikinopettaja, ja hänen äitinsä Cäcilia Weber oli laulaja. Aloysia osoitti varhaista lahjakkuutta musiikissa, ja hän aloitti pianon ja äänen opiskelun isänsä kanssa.
Vuonna 1777 Aloysia perheineen muutti Müncheniin, jossa hän teki lavadebyyttinsä 17-vuotiaana. Hänestä tuli nopeasti menestyvä oopperalaulaja, joka esiintyi päärooleissa Mozartin, Gluckin ja muiden säveltäjien oopperoissa.
Vuonna 1780 Aloysia tapasi Wolfgang Amadeus Mozartin, joka asui silloin Münchenissä. Mozart ihastui välittömästi Aloysiaan, ja hän sävelsi hänelle useita aarioita. Kaksikko oli kihloissa mennäkseen naimisiin, mutta kihla katkesi vuonna 1781.
Aloysia esiintyi menestyksekkäästi oopperalaulajana vuoteen 1790 asti, jolloin hän jäi eläkkeelle lavalta. Hän meni naimisiin hovimuusikon Joseph Langen kanssa vuonna 1795. Pariskunnalla oli kaksi lasta, poika ja tytär.
Eläkkeelle jäätyään Aloysia Weber omistautui musiikin opettamiseen. Hän opetti pianonsoittoa ja ääntä kaikenikäisille opiskelijoille, ja hän oli arvostettu musiikinopettaja Wienissä useiden vuosien ajan. Hän kuoli Wienissä vuonna 1839.